Quy tụ gen mã hóa men recombinase trong đậu nành

 Quy tụ gen mã hóa men recombinase trong đậu nành

Li Jiang, Ruyu Li, Zhiguo Han, Xiaohui Zhao, Dong Cao & David W. Ow. 2022. Target lines for recombinase-mediated gene stacking in soybean. Theoretical and Applied Genetics April 2022; vol. 135: 1163–1175

  

Năm dòng đậu nành chủ đích với các vị trí recombinase hợp lý trong hệ gen được thu thập và xét nghiệm site-specific gene stacking (quy tụ gen đích ở vị trí chuyên biệt).

 

Muốn chuyển gen đích  đối với tính trạng mới nào đó trên giống canh tác ngoài đồng, người ta thêm vào phân tử DNA mới vào transgene locus đúng, điều này sẽ làm giảm số loci phân ly làm thuận tiện cho tái tổ hợp thành dòng con lai ưu việt. Người ta mô tả trước đây  một hệ thống tích hợp có tên in planta transgene thông qua men Bxb1 integrase để DNA mới trực tiếp  vào vị trí đích của genome, nhưng đối với hệ thống này muốn khởi động, locus đích phải có một vị trí tái tổ hợp có tính chất preexisting đối với sự dung hợp có tính chất  Bxb1. Ở đây, người ta mô tả 5 dòng đậu nành có chủ đích từ kết quả sàng lọc 118 cây chuyển nạp thông qua vi khuẩn Agrobacterium có phản ứng dương tính với xét nghiệm gus. Mỗi dòng đậu nành trong số 5 dòng ấy đều có một bản sao đơn của transgenic DNA với các trình tự DNA chính xác tại vị trí xác nhận recombinase, định vị ít nhất 1 kb cách xa vùng mang mật mã di truyền gần nhất, không được gần tâm động, và biểu hiện tốt gen reporter (gus). Người ta xét nghiệm sự hợp nhất trên cơ sở Bxb1 integrase của một plasmid mang gfp vào mỗi một dòng đậu nành và cho thấy có sự hợp nhất tại vị trí đặc biệt một cách chính xác ở những calli theo phương pháp bắn gen. Tái sinh cây được quan sát thông qua kỹ thuật embryonic axes của những hạt đậu nành trưởng thành nhặc thực hiện  một set mới về chuyển gen bằng súng (biolistic transformation) với plasmid tương hợp mang DsRed. Ba cây sự kiện được tái sinh thành công, chúng minh một nguyên tắc rằng:  các dòng chủ đích có thể đóng vai trò như nền tảng (foundation lines) đối với tích hợp DNA đến các vị trí có tính chất định trước (predefined locations) trong hệ gen cây đậu nành.

 

Xem  https://link.springer.com/article/10.1007/s00122-021-04015-6